重组蛋白表达与纯化 - 药研生物技术服务 - CRO药物研发服务

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重组蛋白表达与纯化

维亚生物具有四个蛋白质基因工程表达系统，包括大肠杆菌表达系统、昆虫杆状病毒表达系统、哺乳动物悬浮表达系统、酵母表达系统，我们通过齐全的蛋白表达系统，为客户提供高效的蛋白质表达与纯化服务，以供蛋白结构与功能的研究。

服务内容

质粒构建

维亚生物提供定制化的基因克隆服务，包括优化密码子、基因合成(外包)及后续克隆等。您只需提供基因模板，发送目标载体和克隆的需求或者提供蛋白序列、核酸序列，我们将根据您要求的具体规格，提供现有或量身定制的服务。此外，我们还可提供后续的蛋白高产表达、纯化及生产等一站式服务。

· 亚克隆服务

· 定点突变克隆服务

· 缺失，插入突变克隆服务

· 质粒抽提（Plasmid Endofree Miniprep、Midiprep、Maxiprep、Megaprep、Gigaprep）

· 质粒内毒素去除和测定服务
蛋白高产表达

大肠杆菌表达

· 可将构建好的质粒转化到多种商业化菌株中（如BL21(DE3)、BL21(DE3)Gold、BL21(DE3)CodonPlus RIPL、Rosetta等）；

· 可进行不同温度的诱导表达（16℃-37℃）；

· 可选择不同的培养基（LB、TB、2xYT、M9等）；

· 可选择不同的诱导方式（IPTG诱导、阿拉伯糖诱导、自诱导等）；

· 可选择共表达chaperone提高可溶表达；

· 基于96孔板的高通量表达测试（可测试不同菌株和不同构建的表达差异）；

· 同位素标记蛋白的表达（包括15N标记、15N13C双标记、15N2H双标记、15N13C2H三标记、15N2H双标基础上的13C-Me ILV选择性标记等）。

昆虫杆状病毒表达

· 制备杆状病毒；

· Bac-to-Bac系统、Bacmam系统、线性化共转染系统等制备杆状病毒；

· 提供sf9、HF等细胞的表达优化服务；

· 提供昆虫细胞悬浮培养大规模表达（1000L/月）；

· 每个月可操作性质粒数量：＞200个；

· 提供BIIC形式病毒的制备、保存及优化表达；

· 昆虫细胞瞬转实验（InsectSelect BSD System）。

哺乳动物悬浮表达

· 多种悬浮细胞系的瞬时转染表达和BacMam感染表达的服务：包括Expi293F、ExpiCHOS、Freestyle 293F、Expi293F™ GnTI-细胞等；

· 哺乳动物细胞悬浮培养服务：包括瞬时转染、病毒感染以及稳转细胞系培养的大规模表达（400L/月）；

· 悬浮细胞的稳定表达细胞株的构建服务：用于蛋白大量生产。

酵母表达
蛋白纯化

· 包涵体纯化

蛋白不可溶表达，通过洗涤包涵体后变性溶解，然后纯化复性（或复性后纯化）得到可溶蛋白。

· 分泌蛋白纯化

利用信号肽引导外源蛋白表达分泌到细胞外，直接收集细胞上清（培养基）进行纯化。

· 纯化中涉及到的常用修饰

生物素化（体内或体外）、磷酸化、去磷酸化、去糖基化。

· 纯化中涉及到的酶切

TEV酶切、Ulp1酶切、PreScission（或3C）酶切、Thrombin酶切、Ek酶切等。

· 纯化中涉及到的其他技术

Crosslinking、Nanodisc、Fibrillization等。
蛋白生产

· 可溶性蛋白的生产

· 变复性蛋白的生产

· 分泌蛋白的生产

· 膜蛋白组装

技术与平台

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