维亚生物具有四个蛋白质基因工程表达系统,包括大肠杆菌表达系统、昆虫杆状病毒表达系统、哺乳动物悬浮表达系统、酵母表达系统,我们通过齐全的蛋白表达系统,为客户提供高效的蛋白质表达与纯化服务,以供蛋白结构与功能的研究。
维亚生物提供定制化的基因克隆服务,包括优化密码子、基因合成(外包)及后续克隆等。您只需提供基因模板,发送目标载体和克隆的需求或者提供蛋白序列、核酸序列,我们将根据您要求的具体规格,提供现有或量身定制的服务。此外,我们还可提供后续的蛋白高产表达、纯化及生产等一站式服务。
· 亚克隆服务
· 定点突变克隆服务
· 缺失,插入突变克隆服务
· 质粒抽提(Plasmid Endofree Miniprep、Midiprep、Maxiprep、Megaprep、Gigaprep)
· 质粒内毒素去除和测定服务
大肠杆菌表达
· 各种商业化载体与菌株、自有的同位素标记培养基;
· 可将构建好的质粒转化到多种商业化菌株中(如BL21(DE3)、BL21(DE3)Gold、BL21(DE3)CodonPlus RIPL、Rosetta等);
· 可进行不同温度的诱导表达(16℃-37℃);
· 可选择不同的培养基(LB、TB、2xYT、M9等);
· 可选择不同的诱导方式(IPTG诱导、阿拉伯糖诱导、自诱导等);
· 可选择共表达chaperone提高可溶表达;
· 基于96孔板的高通量表达测试(可测试不同菌株和不同构建的表达差异);
· 同位素标记蛋白的表达(包括15N标记、15N13C双标记、15N2H双标记、15N13C2H三标记、15N2H双标基础上的13C-Me ILV选择性标记等)
昆虫杆状病毒表达
· 擅长于表达各种蛋白复合物;
· 制备杆状病毒;
· Bac-to-Bac系统、Bacmam系统、线性化共转染系统等制备杆状病毒;
· 提供sf9、HF等细胞的表达优化服务;
· 提供昆虫细胞悬浮培养大规模表达(1000L/月);
· 每个月可操作性质粒数量:>200个;
· 提供BIIC形式病毒的制备、保存及优化表达;
· 昆虫细胞瞬转实验(InsectSelect BSD System)
哺乳动物悬浮表达
· 多种悬浮细胞系的瞬时转染表达和BacMam感染表达的服务:包括Expi293F、ExpiCHOS、Freestyle 293F、Expi293F™ GnTI-细胞等;
· 哺乳动物细胞悬浮培养服务:包括瞬时转染、病毒感染以及稳转细胞系培养的大规模表达(400L/月);
· 悬浮细胞的稳定表达细胞株的构建服务:用于蛋白大量生产
酵母表达系统
· 生产分泌蛋白、细胞内蛋白和膜结合蛋白;
· >1,000L/year
· 包涵体纯化
蛋白不可溶表达,通过洗涤包涵体后变性溶解,然后纯化复性(或复性后纯化)得到可溶蛋白。
· 分泌蛋白纯化
利用信号肽引导外源蛋白表达分泌到细胞外,直接收集细胞上清(培养基)进行纯化。
· 纯化中涉及到的常用修饰
生物素化(体内或体外)、磷酸化、去磷酸化、去糖基化。
· 纯化中涉及到的酶切
TEV酶切、Ulp1酶切、PreScission(或3C)酶切、Thrombin酶切、Ek酶切等。
· 纯化中涉及到的其他技术
Crosslinking、Nanodisc、Fibrillization等。
· 可溶性蛋白的生产
· 变复性蛋白的生产
· 分泌蛋白的生产
· 膜蛋白组装
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