维亚生物具有四个蛋白质基因工程表达系统,包括大肠杆菌表达系统、昆虫杆状病毒表达系统、哺乳动物悬浮表达系统、酵母表达系统,我们通过齐全的蛋白表达系统,为客户提供高效的蛋白质表达与纯化服务,以供蛋白结构与功能的研究。
维亚生物提供定制化的基因克隆服务,包括优化密码子、基因合成(外包)及后续克隆等。您只需提供基因模板,发送目标载体和克隆的需求或者提供蛋白序列、核酸序列,我们将根据您要求的具体规格,提供现有或量身定制的服务。此外,我们还可提供后续的蛋白高产表达、纯化及生产等一站式服务。
· 亚克隆服务
· 定点突变克隆服务
· 缺失,插入突变克隆服务
· 质粒抽提(Plasmid Endofree Miniprep、Midiprep、Maxiprep、Megaprep、Gigaprep)
· 质粒内毒素去除和测定服务
大肠杆菌表达
· 各种商业化载体与菌株、自有的同位素标记培养基;
· 可将构建好的质粒转化到多种商业化菌株中(如BL21(DE3)、BL21(DE3)Gold、BL21(DE3)CodonPlus RIPL、Rosetta等);
· 可进行不同温度的诱导表达(16℃-37℃);
· 可选择不同的培养基(LB、TB、2xYT、M9等);
· 可选择不同的诱导方式(IPTG诱导、阿拉伯糖诱导、自诱导等);
· 可选择共表达chaperone提高可溶表达;
· 基于96孔板的高通量表达测试(可测试不同菌株和不同构建的表达差异);
· 同位素标记蛋白的表达(包括15N标记、15N13C双标记、15N2H双标记、15N13C2H三标记、15N2H双标基础上的13C-Me ILV选择性标记等)
昆虫杆状病毒表达
· 擅长于表达各种蛋白复合物;
· 制备杆状病毒;
· Bac-to-Bac系统、Bacmam系统、线性化共转染系统等制备杆状病毒;
· 提供sf9、HF等细胞的表达优化服务;
· 提供昆虫细胞悬浮培养大规模表达(1000L/月);
· 每个月可操作性质粒数量:>200个;
· 提供BIIC形式病毒的制备、保存及优化表达;
· 昆虫细胞瞬转实验(InsectSelect BSD System)
哺乳动物悬浮表达
· 多种悬浮细胞系的瞬时转染表达和BacMam感染表达的服务:包括Expi293F、ExpiCHOS、Freestyle 293F、Expi293F™ GnTI-细胞等;
· 哺乳动物细胞悬浮培养服务:包括瞬时转染、病毒感染以及稳转细胞系培养的大规模表达(400L/月);
· 悬浮细胞的稳定表达细胞株的构建服务:用于蛋白大量生产
酵母表达系统
· 生产分泌蛋白、细胞内蛋白和膜结合蛋白;
· >1,000L/year
· 包涵体纯化
蛋白不可溶表达,通过洗涤包涵体后变性溶解,然后纯化复性(或复性后纯化)得到可溶蛋白。
· 分泌蛋白纯化
利用信号肽引导外源蛋白表达分泌到细胞外,直接收集细胞上清(培养基)进行纯化。
· 纯化中涉及到的常用修饰
生物素化(体内或体外)、磷酸化、去磷酸化、去糖基化。
· 纯化中涉及到的酶切
TEV酶切、Ulp1酶切、PreScission(或3C)酶切、Thrombin酶切、Ek酶切等。
· 纯化中涉及到的其他技术
Crosslinking、Nanodisc、Fibrillization等。
· 可溶性蛋白的生产
· 变复性蛋白的生产
· 分泌蛋白的生产
· 膜蛋白组装
我们支持大肠杆菌、杆状病毒 / 昆虫细胞(Sf9 / Hi5 / Sf21 / S2)、哺乳动物细胞(HEK293 / CHO 瞬时及稳定表达)平台,以及针对特定靶标的毕赤酵母(Pichia pastoris)系统。系统选择通常取决于靶标类型:
我们会综合考量靶标生物学特性、下游应用场景(晶体学、冷冻电镜、SPR 或体内研究)及项目时间线,为您提供系统选择建议。
| 蛋白类型 | 推荐表达系统 |
| 胞质蛋白(小分子量) | 大肠杆菌 |
| 胞质蛋白(大分子量) | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
| 酶类 | 大肠杆菌 / 昆虫细胞 |
| 激酶 | 大肠杆菌 / 昆虫细胞 |
| GPCR | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
| 抗体 | 哺乳动物细胞 |
| 分泌蛋白 | 哺乳动物细胞 |
| 膜蛋白 | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
| 多蛋白复合物 | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
维亚生物在挑战性蛋白靶标领域拥有丰富经验,包括不溶性蛋白、分泌蛋白、膜蛋白及蛋白复合物等。为最大化项目成功率,我们充分利用多个表达平台——包括大肠杆菌、杆状病毒 / 昆虫细胞、哺乳动物细胞及酵母——并根据每种蛋白的特性量身定制纯化策略。
常用策略包括:融合标签筛选、截短 / 结构域边界优化、序列插入、纳米抗体或抗体片段共复合以提升稳定性(如用于冷冻电镜);针对膜蛋白的脂质纳米盘 / 去垢剂筛选。并且,在进入大规模生产前开展迭代式小规模表达试验。
维亚生物膜蛋白表达专利技术能够实现 GPCR、离子通道等挑战性靶标的成功制备。我们的平台整合了优化的表达宿主、稳定化融合伴侣与突变策略、去垢剂 / 纳米盘重组体系,以及构象锁定策略(如纳米抗体共复合),可产出均一、具有功能活性的蛋白样品,直接支持高质量结构解析、SPR 及其他生物物理分析。我们拥有涵盖 120+ 种 GPCR、80+ 种转运蛋白及 50+ 种离子通道的膜蛋白文库。
可以的。维亚生物提供从临床前候选化合物全流程一体化平台,涵盖蛋白表达与纯化、结构解析(X 射线晶体学与冷冻电镜)、苗头化合物发现、先导化合物优化、生物测定及药理学,所有服务均可在维亚生物内部无缝衔接、统一交付。我们的核心优势在于蛋白表达与结构生物学高度整合,构成无缝一体化工作流程。蛋白表达团队在项目初期便针对下游结构应用进行优化,涵盖 X 射线晶体学、冷冻电镜及 SPR、ASMS 等生物物理分析,从而消除交接延迟,确保全程样品质量,显著缩短项目周期,降低风险。
可以的。我们建议在项目启动时即确定功能性 QC 标准,以确保在开展结构解析或化合物筛选之前,明确界定项目成功的评判依据。
根据靶标特点,维亚可提供以下服务:酶活力测定、配体结合分析(SPR、ITC、荧光偏振),以及核苷酸负载状态验证(如 GTP酶 的 GDP / GTPγS 状态)。
我们支持大肠杆菌、杆状病毒 / 昆虫细胞(Sf9 / Hi5 / Sf21 / S2)、哺乳动物细胞(HEK293 / CHO 瞬时及稳定表达)平台,以及针对特定靶标的毕赤酵母(Pichia pastoris)系统。系统选择通常取决于靶标类型:
我们会综合考量靶标生物学特性、下游应用场景(晶体学、冷冻电镜、SPR 或体内研究)及项目时间线,为您提供系统选择建议。
| 蛋白类型 | 推荐表达系统 |
| 胞质蛋白(小分子量) | 大肠杆菌 |
| 胞质蛋白(大分子量) | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
| 酶类 | 大肠杆菌 / 昆虫细胞 |
| 激酶 | 大肠杆菌 / 昆虫细胞 |
| GPCR | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
| 抗体 | 哺乳动物细胞 |
| 分泌蛋白 | 哺乳动物细胞 |
| 膜蛋白 | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
| 多蛋白复合物 | 昆虫细胞 / 哺乳动物细胞 |
维亚生物在挑战性蛋白靶标领域拥有丰富经验,包括不溶性蛋白、分泌蛋白、膜蛋白及蛋白复合物等。为最大化项目成功率,我们充分利用多个表达平台——包括大肠杆菌、杆状病毒 / 昆虫细胞、哺乳动物细胞及酵母——并根据每种蛋白的特性量身定制纯化策略。
常用策略包括:融合标签筛选、截短 / 结构域边界优化、序列插入、纳米抗体或抗体片段共复合以提升稳定性(如用于冷冻电镜);针对膜蛋白的脂质纳米盘 / 去垢剂筛选。并且,在进入大规模生产前开展迭代式小规模表达试验。
维亚生物膜蛋白表达专利技术能够实现 GPCR、离子通道等挑战性靶标的成功制备。我们的平台整合了优化的表达宿主、稳定化融合伴侣与突变策略、去垢剂 / 纳米盘重组体系,以及构象锁定策略(如纳米抗体共复合),可产出均一、具有功能活性的蛋白样品,直接支持高质量结构解析、SPR 及其他生物物理分析。我们拥有涵盖 120+ 种 GPCR、80+ 种转运蛋白及 50+ 种离子通道的膜蛋白文库。
可以的。维亚生物提供从临床前候选化合物全流程一体化平台,涵盖蛋白表达与纯化、结构解析(X 射线晶体学与冷冻电镜)、苗头化合物发现、先导化合物优化、生物测定及药理学,所有服务均可在维亚生物内部无缝衔接、统一交付。我们的核心优势在于蛋白表达与结构生物学高度整合,构成无缝一体化工作流程。蛋白表达团队在项目初期便针对下游结构应用进行优化,涵盖 X 射线晶体学、冷冻电镜及 SPR、ASMS 等生物物理分析,从而消除交接延迟,确保全程样品质量,显著缩短项目周期,降低风险。
可以的。我们建议在项目启动时即确定功能性 QC 标准,以确保在开展结构解析或化合物筛选之前,明确界定项目成功的评判依据。
根据靶标特点,维亚可提供以下服务:酶活力测定、配体结合分析(SPR、ITC、荧光偏振),以及核苷酸负载状态验证(如 GTP酶 的 GDP / GTPγS 状态)。